Como avaliar o efeito antimofo do agente antimofo para couro?
A avaliação do efeito antifúngico do agente antifúngico para couro geralmente inclui dois aspectos. Por um lado, a detecção da eficácia do agente antifúngico, cujo principal objetivo é determinar se o medicamento tem a capacidade de inibir ou matar o fungo.
Os métodos de avaliação comumente usados incluem: método de zona de inibição, método de derramamento em placa, método de bactérias locais, método de cultura de diluição, método de difusão, determinação da concentração inibitória mínima (MIC), etc .; por outro lado, efeito antifúngico após adição do inibidor de mofo ao couro. Os métodos de avaliação laboratorial comumente usados incluem: método da zona de inibição, método de exposição natural, método de suspensão em câmara úmida, método de enterramento do solo, método do meio e semelhantes.
Atualmente, os métodos de avaliação laboratorial freqüentemente usados pelos curtidores são os seguintes.
(1) método de zona de inibição
Usando um papel redondo ou uma pele redonda (geralmente de 2 a 4 cm de diâmetro), imerso ou girado em uma certa concentração da solução do agente antimofo por um período de tempo e, em seguida, anexado a uma cultura de revestimento com uma certa quantidade de suspensão de esporos de molde Centralize a placa e incube por um período de tempo a uma temperatura de (28 ± 1) ° C, umidade relativa ≥ 95%, observe a presença ou ausência de uma zona transparente de inibição ao redor do papel redondo ou pele redonda ou use um compasso Vernier para medir o diâmetro do círculo do cogumelo. O método da zona de inibição é apenas um método qualitativo ou semiquantitativo, e o tamanho da zona de inibição é afetado pela capacidade do inibidor de fungo de se espalhar na placa de ágar (com a natureza do inibidor de fungo, o solvente do inibidor de molde dissolvido no inibidor de molde) O tipo, a composição do meio, a distribuição do agente antifúngico na pele e as condições da cultura são muito afetadas e, portanto, o efeito de referência é limitado. No entanto, este método também tem as vantagens de operação simples, identificável a olho nu, boa visualidade e semelhantes, e é freqüentemente usado para a avaliação preliminar do efeito à prova de mofo do inibidor de mofo.
(2) Método de concentração inibitória mínima (MIC)
O inibidor de mofo de teste é formulado em uma série de concentrações e, em seguida, 1 mL é retirado assepticamente, adicionado à placa de cultura esterilizada e, em seguida, 1 mL da suspensão bacteriana de teste é injetado em cada placa de cultura (ou por alça de inoculação). a suspensão da cepa de teste é semeada na placa de meio de ágar à qual o fungicida é adicionado e solidificado e, finalmente, um meio de ágar a 40 ° C predeterminado é injetado em cada uma das placas de cultura e uniformemente misturado e coagulado. É colocado em um ambiente com temperatura de (28 ± 1) ° C e umidade relativa ≥ 95% por um período de tempo (geralmente 3 a 5 dias), e a menor concentração das espécies de teste pode ser verificada e comparados. O método MIC é um método quantitativo, que pode refletir melhor a virulência do agente antifúngico e facilitar a comparação dos efeitos antimofo entre os diferentes agentes antifúngicos. É um dos métodos de expressão de virulência mais comumente usados. No entanto, existem muitos fatores que afetam o valor de MIC, como a fonte da cepa de teste, a quantidade de inóculo, o número de esporos de mofo na suspensão de esporos de mofo, o meio, o tipo de solvente no qual o inibidor de mofo é dissolvido, o condições de cultura, etc., portanto A MIC do inibidor de molde deve ser realizada nas mesmas condições.
(3) Método de suspensão em câmara úmida
A pele tratada com agente anti-mofo (geralmente um quadrado longo de 2,5 cm × 5,0 cm) é borrifada na superfície da pele com um spray do molde para suspensão de esporos e, em seguida, suspenso em uma câmara de temperatura e umidade constantes. A temperatura era (28 ± 1) ° C, umidade relativa ≥ 95%] cultivada por 28 dias, e a condição de míldio foi observada regularmente, e o efeito do míldio do inibidor de míldio foi avaliado pela condição de míldio longo da pele.
As cepas testadas são geralmente Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Penicillium citrinum, Penicillium fuliginea e Trichoderma. Este método de medição é um teste acelerado que simula o ambiente natural. A resistência do molde da amostra é de 0 ou 1 grau, e os outros não são qualificados. Cada um desses métodos tem suas próprias vantagens e desvantagens. Para o mesmo agente anti-mofo, diferentes métodos de avaliação podem ser usados. Os resultados podem não ser os mesmos. Mesmo se o mesmo método for usado, os resultados serão diferentes devido a diferentes condições, como hora, local e testador. Diferenças. Portanto, os métodos de teste de aceleração desses laboratórios têm apenas determinado valor de referência, e o desempenho real da aplicação do antifúngico também deve ser verificado pela aplicação prática.
